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北京磷酸甘油测试——清析客户检测案例
类别：客户案例
273
2022-11-17
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2022-11-17
2022年09月15日，客服中心反馈北京某细胞公司的产品有检测需求，接到反馈后，检测实验室工程师第一时间与客户进行详细沟通，情况如下：
客户背景
客户是北京某细胞公司的生物实验室的主任，由于实验室研发的一批多糖原液需要测试样品的浓度含量，需要根据客户技术提供的方法方案的指导原则进行磷酸甘油的测试需求，而自身条件无法提供试验需求的情况下，委托我方进行检测，并出具检测报告。
样品名称
多糖原液
客户需求
根据客户技术提供的方法方案的指导原则进行磷酸甘油的测试需求
解决方案
一、测试项目：多糖修饰的磷酸甘油基团
二、样品编号：JXD-1、JXD-2、JXD-3、JXD-4、JXD-5、LDM-1、LDM-2、LDM-3、LDM-4、FJH
三、测试方法：
1、样品前处理（酸解）：
取400μL JXD-1样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL去离子水，使用0.22μm滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为JXD-1；
取 400μL JXD-2样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在 40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA 溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为JXD-2；
取400μL JXD-3样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入 1mL 2M TFA溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL去离子水，使用0.22μm膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为JXD-3；
取 400μL JXD-4 样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入 200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应 2h，在40℃下，氮气吹干；加入 1mL 2M TFA 溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应 4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入 400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为JXD-4；
取400μL JXD-5样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入 200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在 0℃下，氮气吹干；加入 1mL 2M TFA 溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入 400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为JXD-5；
取400μL LDM -1样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为LDM -1；
取 400μL LDM -2 样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入 200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA 溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为LDM -2；
取 400μL LDM -3 样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA 溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释 10 倍，转移至自动进样瓶中，标记为LDM -3；
取 400μL LDM-4 样品加入 1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入 200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入 1mL 2M TFA溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL 去离子水，使用0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为LDM-4；
取 400μL FJH 样品加入1.5mL EP管中，使用离心浓缩仪冻干样品；加入 200μL 48%（v/v）HF，50℃恒温反应2h，在40℃下，氮气吹干；加入1mL 2M TFA溶解样品，转移至玻璃管中，120℃恒温反应4h；使用离心浓缩仪干燥样品，加入400μL 去离子水，使用0.22μm滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为 FJH；
分别取20μL上述样品加入1.5mL EP管中，涡旋混合均匀，使用0.22μm滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为QC；
分别取20μL上述样品加入1.5mL EP管中，涡旋混合均匀，加入20μL 40ppm标准品，使用 0.22μm 滤膜过滤样品，稀释10倍，转移至自动进样瓶中，标记为QC-R，用于计算回收率；
2、标准曲线：
准确称取磷酸钠配置成0.1M母液，使用超纯水逐级稀释成20ppm、10ppm、5ppm、2ppm、1ppm、0.5ppm、0.2ppm 等，分别进样分析，获得浓度-峰高线性关系；
3、液相及方法：Dionex ICS-5000 离子色谱仪；
进样体积：25μL；
柱温：30℃；
流动相：Na2CO3-NaHCO3梯度洗脱。
客户反馈
经过试验方案和结果的讨论总结，客户对我方提供的结果数据以及过程结果表示认可和赞誉，在最短的时间内将实验完成，并根据相应结果出具报告，数据真实详细，对客户产品的进一步研发起到了不可忽略的作用。此次合作也是我方与神州细胞工程有限公司的第五次合作，优异的效率再一次得到了对方的认可和赞誉。同时也为双方的进一步发展合作打下夯实基础。
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